낮은 바인딩 피펫 팁 소수성 내부 표면 설계로 인해 샘플 잔기를 크게 감소시킬 수 있으며, 특히 비싼 시약, 점성 액체 또는 미량 샘플 (단백질 및 핵산)을 취급하는 데 특히 적합합니다. 그러나 제대로 작동하지 않으면 실험의 정확성과 반복성에 여전히 영향을 줄 수 있습니다. 다음은 실험실 운영 사양과 함께 사용되는 일반적인 오류 및 솔루션에 대한 분석입니다.
오해 1 : 팁의 사전 링크를 무시합니다
잘못된 작동 : 샘플을 직접 흡인하고 사전 린싱 단계를 생략하십시오.
충격 : 낮은 바인딩 피펫 팁은 잔류 물, 혈청, 단백질 또는 유기 용매와 같은 샘플의 경우 잔류 물을 줄일 수 있지만, 내벽은 표면 장력으로 인해 미세 액체 필름을 형성하여 초기 피펫 팅 부피가 낮아질 수 있습니다.
올바른 접근법 : 공식적인 피펫 팅 전에 동일한 샘플로 포부 증거를 2 ~ 3 회 반복하여 팁의 내부 벽에 안정적인 액체 필름 층을 형성하십시오 (고온/저온 액체 제외).
오해 2 : 흡인 속도가 너무 빠르거나 각도가 기울어집니다.
잘못된 작동 : 액체를 빨리 흡인하거나 피펫이 20 ° 이상 기울어집니다.
영향:
피펫이 너무 빨리 : 거품 또는 등 흡입 (액체는 피펫으로 돌진하여 피스톤을 오염시킨다);
피펫 틸트 : 액체 표면 압력을 변화시켜 피펫 팅 부피가 부정확하고 잔류량이 증가합니다. 올바른 접근법 :
천천히 피펫과 천천히 방출하십시오 : 일정한 속도로 작동하고 피스톤 방출 속도를 제어합니다.
수직으로 고정하십시오 : 피펫 팁이 액체 표면에 담그면 기울기 각도 ≤20 °를 유지하십시오.
오해 3 : 점성 액체의 작동 차이를 무시합니다
잘못된 작동 : 고격도 샘플 (예 : 글리세롤 및 세포 현탁액)의 일반 액체와 동일한 피펫 팅 속도를 사용하십시오.
충격 : 점성 액체는 피펫 팁의 내벽에 천천히 흐르고 빠른 배출은 잔류 부피가 크게 증가하여 낮은 흡착 설계의 장점을 상쇄합니다.
올바른 접근법 :
침지 시간 연장 : 제거하기 전에 흡인 후 1 초 동안 액체 표면에 머무르고 1 초 동안 일시 중지하기 전에 두 번째 기어를 눌러 배출 할 때 액체를 날려 버립니다.
넓은 입 피펫 팁 : 거대 분자 또는 세포 샘플의 경우 전단력을 줄이기 위해 넓은 입력 피펫 피펫 팁 (표준 조리개보다 70% 큰)을 사용하십시오.
오해 4 : 팁을 설치할 때 강타
잘못된 작동 : 피펫 핸들을 반복적으로 눌러 팁을 "조입니다".
효과 : 장기 영향은 피펫 밀봉 구성 요소를 착용하고 밀폐를 파괴하며 누출 또는 부피 오류를 유발합니다.
올바른 방법 : 피펫을 수직으로 팁에 삽입하고 가볍게 누르고 왼쪽과 오른쪽을 약간 돌리십시오.
오해 5 : 잘못된 저장 또는 재사용
잘못된 작동 :
팁에 잔류 액체가있을 때 피펫을 평평하게하십시오.
비용 절감을위한 일회용 저 흡수 팁을 재사용하십시오. 영향:
평평한 배치는 액체의 역류를 유발하여 피스톤 스프링을 부식시킵니다.
재사용은 교차 오염 또는 구조적 변형으로 인해 정확도에 영향을 줄 수 있습니다. 올바른 방법 :
피펫 팅 직후에 팁을 버리고 피펫을 수직으로 매달립니다.
PCR 및 동위 원소와 같은 민감한 실험과 관련하여 재사용은 엄격하게 금지됩니다.
전문적인 조언 : 저하 요령의 장점을 극대화하십시오
액체의 특성과 일치하십시오.
휘발성 액체 (예 : 클로로포름) : 일반적인 저지대 팁을 사용하지 않고 휘발성 시약을 위해 설계된 용매 안전 팁 또는 외부 피스톤 피펫을 사용하십시오.
교정 검증 :
실제 부피가 표준에 충족하는지 여부를 확인하기 위해 분석 균형 (1ml = 0.9982g)으로 피펫 팅 된 순수한 물의 무게를 정기적으로 무게를 측정하십시오.
주요 포인트 요약 : 샘플 손실을 줄임으로써 낮은 환원 팁이 정확도를 향상 시키지만 작업의 세부 사항이 무시되면 여전히 비생산적 일 수 있습니다. 표준화 된 설치, 속도 제어, 샘플 특성에 대한 적응 및 엄격한 일회성 실험은 높은 반복 실험을 달성하기위한 기초입니다 .
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